Как проводится диагностика цитомегаловируса по анализам крови, мочи, мазка

Лабораторная диагностика цитомегаловирусной инфекции (CMV-инфекции) включает в себя выполнение двух типов реакций. Первые направлены на выявление специфических антител. Вторые связаны с обнаружением самого цитомегаловируса (CMV), его генетического материала или отдельных антигенов.

Основные субстраты для исследования:

• сыворотка крови (венозная, необходимо сдать натощак, минимально возможный голодный интервал – 4 часа);
• ликвор (спинномозговая жидкость);
• слюна;
• моча;
• мазки из уретры и влагалища, цервикального канала;
• смывы с трахеи и бронхов, мокрота.

Какие методы используются для выявления CMV

Среди огромного количества методов, предназначенных для обнаружения микроорганизмов у обследуемого, в диагностике CMV-инфекции используются:

• РСК (реакция связывания комплемента);
• РИФ (реакция иммунофлюоресценции);
• ИФА (иммуноферментный анализ);
• Твердофазный радиологический анализ;
• Иммуноблотинг;
• ПЦР;
• ДНК-гибридизация;
• Культурологический метод;
• Цитологию.

Последний метод выявляет цитомегаловирус в мазке или срезе на основании обнаружения «цитомегалических клеток», которые подверглись морфологическому изменению под воздействием вируса. Они имеют крупные внешне запоминающиеся ядра. Чаще применяют для исследования срезов биоптатов, осадков после центрифугирования мочи и слюны, смывов с бронхов.

Все вышеперечисленные методы имеют разную чувствительность и специфичность (это такие специальные характеристики методов обследования, определяющие процент ложноположительных и ложноотрицательных результатов).

В таблице ниже сгруппирована информация о возможностях самых популярных из перечисленных выше методов диагностики цитомегаловирусной инфекции.

На практике чаще всего используются второй-четвертый пункты.

Определение уровней антител к цитомегаловирусу

Уровень и факт наличия антител к цитомегаловирусу в практической медицине чаще определяют с помощью ИФА и иммуноблотинга. Для анализа на цитомегаловирус венозную кровь следует сдать натощак. Количественно положительным результат считается при титре 1:100 (обычно, но у различных лабораторий могут быть разные реактивы), однократное определение даже высокого титра иммуноглобулинов IgG, IgM особого диагностического значения не имеет. Помимо титров также важно определение степени авидности антител класса G – то есть оценка плотности связывания этих иммуноглобулинов с антигенами цитомегаловируса. У различных лабораторий разные референсные значения показателей авидности. Так, например, «Инвитро» дает следующие значения:

1. До 0,3 – низкая авидность.
2. Выше 0,3 – высокая.

В других источниках значение показателя до 35% считается низкой авидностью, 36-41% – средней, более 42% – высокой.

Для дифференциальной диагностики состояний, обусловленных присутствием в организме цитомегаловируса, обследование выполняют «методом парных сывороток»: кровь на анализ берется дважды с интервалом в 2-3 недели, при этом каждый раз оценивается титр и авидность. Диагностически важные критерии: нарастание титра в динамике в четыре и более раза и нарастание индекса авидности.

Расшифровка результатов, полученных при обследовании, представлена в таблице ниже.

Определение ДНК и отдельных антигенов

Определить наличие ДНК в исходном материале цитомегаловируса можно с помощью ПЦР или ДНК-гибридизации, оба метода являются высокочувствительными, на практике чаще используют ПЦР. Для анализа на цитомегаловирус могут быть использованы любые субстраты, даже взятые на биопсию.

ПЦР используется лишь как дополнительный метод обследования. Это связано с его высокой чувствительностью. Вместе с тем до 90% взрослого населения РФ имеют носительство цитомегаловируса, которое не означает его активность в организме. Некоторые авторы-медики предлагают считать обнаружение ДНК вируса в сыворотке крови и ликворе активной CMV-инфекцией, а обнаружение генетического материала в моче, слюне, мазках из уретры и цервикального канала/влагалища возможно и при латентном (скрытом) течении инфекции.

Расшифровка результатов обследования методами ПЦР и ДНК-гибридизацией в сочетании с определением уровней специфических иммуноглобулинов приведена в таблице ниже.

(1). При этом, по их мнению, наличие нарастающего титра антител (в 4 и более раз), обнаружение IgM, обнаружение ДНК вируса в крови и в моче не являются достаточными критериями для постановки диагноза.

Как бы то ни было, на текущий момент для диагностики активности CMV-инфекции в организме используют комбинацию методов: определение уровня антител и выявление самого вируса и его антигенов в различных субстратах.

Кого необходимо обследовать на цитомегаловирус

Среди населения можно выделить категории граждан, требующие наиболее пристального внимания в отношении цитомегаловирусной инфекции:

• беременные женщины и женщины в период предгравидарной подготовки;
• новорожденные дети;
• дети с частыми ОРВИ;
• дети и взрослые с иммунодефицитными состояниями, врожденными или приобретенными, в т.ч. ВИЧ;
• дети и взрослые с онкологией;
• дети и взрослые, получающие цитостатики;
• все граждане, имеющие клинические проявления данной инфекции.

Источники:

1. Проблемы лабораторной диагностики цитомегаловирусной инфекции у ВИЧ-инфицированных пациентов. В.И. Шахгильдян, О.Ю. Шипулина, Н.В. Каражас, В.М. Стаханова, Л.Ф. Евсеева, О.А. Тишкевич. Российский Федеральный НМЦ ПБ СПИД, г.Москва, НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН, г.Москва, Клиническая инфекционная больница №2, г.Москва.
2. Врожденная цитомегаловирусная инфекция. Скрытая угроза. Т.А. Артемчик, УО «Белорусский государственный медицинский университет».
3. Цитомегаловирусная инфекция в клинике внутренних болезней. В.В. Скворцов, Р.Г. Мязин, Д.Н. Емельянов. Журнал «Лечащий врач», №9, 2004